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邢国兰教授肾活检组织激光微切割质谱分析技

邢国兰教授

专家简介

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医院肾脏内一科主任,肾脏病理中心主任

郑州大学肾脏病研究所副所长

主任医师,教授,博士生导师

河南省医学会肾脏病理学分会主任委员

郑州市肾脏病专业委员会副主任委员

河南省肾脏病专业委员会常委

国家自然基金项目评审专家

激光微切割联合液相色谱串联质谱分析(LC-MS/MS)是一种用于分析各种类型组织和细胞标本的高通量、高敏感和高特异性的蛋白质组学检测方法。肾活检组织通过可发射低能红外激光的微切割显微镜选择性获取目标肾组织区域(肾小球、肾小管、间质及血管等)并最小化组织背景,切割后的目标组织进行超粉碎和胰酶消化,通过基于检测肽段的质荷比质谱分析,提供了高通量和高精度的肾活检组织蛋白质组学信息。

目前LC-MS/MS技术应用在临床主要是作为肾淀粉样变性病的分型诊断,在肾淀粉样变性病的分型诊断中LC-MS/MS不仅用于已知肾淀粉样变性前体蛋白的验证,而且是发现新的肾淀粉样变前体蛋白的有效手段,与传统病理学的免疫荧光(组化)和刚果红染色、偏振光显微镜及电镜诊断方法相比,LC-MS/MS具有不依赖形态学特征和不受抗体质量高低,以及前体蛋白构象变化和翻译后修饰经常导致抗原表位改变等因素影响的特点。利用LC-MS/MS技术也可用于帮助模棱两可的膜增生性肾小球肾炎的分型诊断,发现与肾脏疾病活动和预后相关的生物标志物,明确和鉴定不明致病因素的肾脏疾病致病分子。

此外,肾活检组织LC-MS/MS分析的高通量和高精度蛋白组学信息及蛋白翻译后修饰的分析,为阐明肾脏疾病的发病机制提供了新的证据。激光微切割联合质谱分析延伸了肾脏病理的诊断深度由组织细胞水平进一步走向了分子水平,对肾脏疾病的精准诊断至关重要,已经成为阐明肾脏疾病的发病机制与病理生理过程重要技术手段之一。近年来,原位质谱技术的应用为组织细胞的蛋白质谱的空间定位提供了有力的技术支持,为肾脏疾病的临床诊断和基础研究拓展了更广阔的技术空间。

编辑/排版:vivi

审校:五百岁

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